Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri – UFVJM

Curso de Graduação em Farmácia

Disciplina de Fundamentos em Farmacotécnica Homeopática

Aplicação de preparado homeopático de Escherichia coli para verificação de inibição do crescimento bacteriano em cultura.

Equipe:

Alex Braga Azevedo

Flavio Simões

Juarez Henrique Gonçalves

Núbia Lafayete Evangelista

Diamantina, 2013.

Introdução

A Homeopatia foi fundamentada em 1796, pelo médico alemão Samuel Hahnemann. A Homeopatia teve início como terapêutica humana. A partir de 1920, no Instituto de Biologia (Stuttgart, Alemanha), tem-se relato das experimentações em plantas. Foram realizados centenas de ensaios por Kolisko e Kolisko (1923), orientados por Rudolf Steiner, com muitas espécies vegetais e cerca de 300 preparados homeopáticos feitos com sais minerais e com plantas. No Brasil, cabe ressaltar a publicação do Guia de Veterinária Homeopática, do autor Nilo Cairo, em 1920 (Andrade e Casali, 2010).

A Ciência da Homeopatia é embasada em princípios, quais sejam: semelhança, experimentação, medicamento único e soluções altamente diluídas e dinamizadas, sendo o último o mais questionado pelo fato de que quanto maior a diluição, menos moléculas permanecem na solução até o momento que ultrapassa o número de Avogadro (na diluição 12C) e a solução passa a ser não-molecular. Portanto seu efeito não é químico (doses infinitesimais) e sim físico (dinamizações), onde a ação de equilibrar os sistemas vivos resulta da propriedade da homeopatia de interferir no princípio vital, ou seja, no sistema de vitalidade que mantém funcionando o organismo (Duarte, 2007).

A E. coli assume a forma de um bacilo e pertence à família das Enterobacteriaceae. São aeróbias e anaeróbias facultativas. O seu habitat natural é o lúmen intestinal dos seres humanos e de outros animais de sangue quente. Possui múltiplos flagelos dispostos em volta da célula.¹

A E. coli é um dos poucos seres vivos capazes de produzir todos os componentes de que são feitos, a partir de compostos básicos e fontes de energia suficientes. Ela é lactase positiva, uma enzima fermentadora de açúcares que é grandemente responsável pela flatulência de cada pessoa, especialmente após o consumo de leite e seus derivados.

Objetivo

            Verificar se há inibição de crescimento bacteriano em cultura de E. coli, após utilização do tratamento com medicamento homeopático, comparado com hipoclorito de sódio 2%, álcool 70% e dióxido de cloro.

Metodologia

            Inibição do crescimento bacteriano, pela técnica de difusão em disco, do medicamento e controles positivos e negativo (água), e, posteriormente medição do raio do alo formado na cultura.

Materiais

Capela de fluxo laminar

Álcool cereal 30 e 70%

Aparelho dinamizador

Solução de E. coli em salina a 0,9%

Béquer *

Conta gotas *

Placas de Petri com meio sólido Agar Mueller Hinton *

Frasco dinamizador *

Frasco dispensador *

Batoque *

Proveta *

Discos de papel estéril *

Conta-gotas *

Alça de Drigalski descartável (estéril)

* Materiais esterilizados em autoclave

Procedimento

Preparou-se o meio Agar Mueller Hinton (sólido), quantidade suficiente para ser vertido em 14 placas de petri, mais ou menos 350 mL;

O meio e os materiais supracitados foram autoclavados;

Em uma capela de fluxo laminar, foram feitos todos os experimentos. Preparado uma suspensão supersaturada de E. coli em salina 0,9%;

Prepararam-se as placas com o meio Agar Mueller Hinton. Depois de solidificado, foi adicionado ao meio aproximadamente 1 mL de solução de E. coli que foi espalhada por todo o meio com uma alça de Drigalski;

Pegou-se, em condições assépticas, 6 gotas da suspensão de E. coli, colocou em uma proveta e adicionou-se álcool absoluto, quantidade suficiente para 30 mL. Esse volume foi vertido em um frasco dinamizador, levado ao aparelho dinamizador onde foi dinamizado 100 vezes. Obteve-se uma solução estoque, CH0, que foi etiquetada;

A partir da tintura mãe foram preparados duas diluições, CH3 e CH10. O laboratório dispunha de uma diluição CH30 que também foi testada no experimento.

A partir da tintura mãe, pegou-se 6 gotas e colocou em uma proveta. Completou-se o volume com água destilada quantidade suficiente para 30 mL. O volume foi vertido em um frasco dinamizador e levou-se ao parelho dinamizador, onde se dinamizou 100 vezes. Dessa forma obteve-se o medicamento homeopático a uma potencia CH1.

A partir desta potencia, pelo mesmo procedimento obteve-se a potencia CH2. A partir da potencia CH2, obteve-se a potencia CH3 e assim por diante ate a potencia CH10;

As potencias CH3 e CH10 foram estocadas e suas dinamizações foram feitas com álcool cereais 30%;

Depois de preparado os medicamentos homeopáticos utilizados, os mesmos foram vertidos em béqueres identificados com as respectivas diluições. Também foram identificados béqueres contendo a solução de hipoclorito de sódio 2%, álcool 70%, dióxido de cloro (controles positivos) e água destilada estéril (controle negativo);

Os discos de papel foram mergulhados nas soluções, um total de 4. Em seguida, os discos foram aplicados nas placas contendo o inoculo;

As placas foram incubadas a 37º C e após 24 horas foi feita a medida do halo para verificar inibição do crescimento.

Resultados e discussão

Após realizados os procedimentos mediu-se os halos formados após o período de  incubação. Os resultados obtidos são mostrados na tabela abaixo.

Tabela 1: Média dos halos obtidos após 24 horas de crescimento.

Como pode ser verificado na tabela 1 os homeopáticos tiveram resultados semelhantes, não inibindo o crescimento bacteriano satisfatória quando comparada aos controles positivos.

Conclusão

Neste experimento não observou-se atividade antimicrobiana dos homeopáticos  testados.